医生根据病史，体格检查，实验室检查以及其他辅助检查可诊断。患者多有胃肠手术或其他严重疾病史，并在近期内用过抗生素，尤其是广谱抗生素。症状的发生多见于抗生素治疗4～10天内或在停用抗生素后1～2周内。有腹泻、腹痛,部分患者可排出斑块状伪膜，也可伴有腹胀、恶心、呕吐、发热等症状。可出现脉搏加快、血压下降、呼吸急促等休克表现，脱水征象；精神错乱等中毒变化；腹部压痛、腹肌紧张、肠胀气及肠鸣音减弱等体征。粪便涂片检查，检出难辨梭状芽胞杆菌毒素。X线检查，可见肠管胀气和液平。纤维结肠镜检查，可见黏膜发红、水肿，表面有斑块或已融合成的伪膜。